VDRL - Técnica

O VDRL é um teste não treponêmico que detecta anticorpos não específicos dirigidos contra um complexo de lecitina, colesterol e cardiolipina (sendo a ligação destes componentes denominada micela), utilizado para triagem de Treponema pallidum. Os anticorpos não treponêmicos presentes na amostra ligam-se às cardiolipinas das micelas, resultando em floculação (observada em microscopia).

Esse teste para diagnóstico da sífilis é realizado através da pesquisa de anticorpos (reagininas) no soro, plasma ou líquido céfalo-raquidiano. Quando a suspensão antigênica do VDRL é misturada a uma amostra positiva, as partículas de antígeno floculam. Ausência de floculação indica resultado negativo.

TÉCNICA - Labtest

Amostra: soro

TESTE QUALITATIVO

1. Pipetar 50 µL da amostra ou dos controles em uma cavidade da placa escavada (placa de Kline);

2. Dispensar 20 µL da suspensão antigênica sobre a amostra. Não é necessário misturar os dois componentes;

3. Colocar a placa em um agitador mecânico e agitar durante 4 minutos a 180 rpm;

4. Imediatamente após 4 minutos, observar o resultado ao microscópio utilizando o aumento de 100x, comparando o resultado da amostra com os obtidos para os controles positivo e negativo. 

OBS: As leituras devem ser realizadas imediatamente após o período de agitação, pois leituras tardias podem apresentar resultados falsos. 

TESTE SEMI-QUANTITATIVO

1. Preparar diluições seriadas do soro, 1/2, 1/4, 1/8, 1/16, 1/32 em tubos de ensaio utilizando solução salina (0,9%):

Adicionar 0,1 mL de solução salina em cada tubo. Transferir para o 1º tubo 0,1 mL da amostra que apresentou teste qualitativo positivo. Misturar e transferir 0,1 mL do 1º para o 2º tubo, misturar e transferir 0,1 mL do 2º para o 3º tubo e assim sucessivamente até o 5º tubo. Obtêm-se diluições 1/2, 1/4, 1/8, 1/16, 1/32, respectivamente. 

2. Pipetar 50 µL das diluições em cada cavidade da placa escavada (placa de Kline); 

3. Dispensar 20 µL da suspensão antigênica sobre a amostra. Não é necessário misturar os dois componentes;

4. Colocar a placa em um agitador mecânico e agitar durante 4 minutos a 180 rpm;

5. Imediatamente após 4 minutos, observar o resultado ao microscópio utilizando o aumento de 100x, comparando o resultado da amostra com os obtidos para os controles positivo e negativo;

6. Será considerado como título a maior diluição da amostra que apresentar aglutinação microscópica. Se a aglutinação estiver presente até 1/32, continuar as diluições a partir do 5º tubo e prosseguir com o teste. 

RESULTADOS E INTERPRETAÇÃO

TESTE QUALITATIVO

Reativo: Agregados médios e grandes. 

Reativo Fraco: Agregados finos dispersos. 

Não Reativo: Ausência de agregados, aspecto homogêneo. 

TESTE SEMI-QUANTITATIVO

O título corresponde à última diluição que apresenta um resultado positivo. 

Os controles Positivo e Negativo devem ser analisados em cada conjunto de testes. Se os resultados obtidos para os controles forem divergentes, os resultados das demais amostras devem ser considerados inválidos. 

Um resultado reativo fraco ou duvidoso deve ser repetido. 

Resultado positivo indica a necessidade de realização de teste específico para a confirmação da presença do treponema. 

VDRL negativo 

VDRL positivo 

LIMITAÇÕES DO PROCEDIMENTO

Resultado falso negativo pode ocorrer na sífilis secundária (1% a 2%) devido ao excesso de anticorpos (efeito prozona). Para evitar esta ocorrência, recomenda-se testar todas as amostras sem diluir e diluídas 1:8. 

REFERÊNCIA: Bula Labtest